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Elisa試劑盒實(shí)驗的正確加樣方法
更新時間:2016-11-10   點(diǎn)擊次數(shù):1243次

Elisa試劑盒在的運(yùn)用進(jìn)程中常見疑問有很多,如加樣器不確;格外10ul以下的加樣器,對效果影響極大;保溫設(shè)備不良;洗刷用水不規(guī)范。 
那我們怎樣處理這些疑問呢: 
:仔細(xì)閱讀運(yùn)用說明書。 
第二:仔細(xì)校正溫度到37℃,水浴箱為佳;  
第三:在運(yùn)用進(jìn)程校正加樣器;10ul以下加樣器選用進(jìn)口產(chǎn)品(芬蘭、法國等); 
第四:有必要運(yùn)用去離子水或蒸餾水,不得用自來水、礦泉水等。 
樣品加樣
1 沒有混勻。加樣時一定要仔細(xì)。加樣后,再檢查,以防漏加、錯加。
2 加樣不;
3 加樣后,重復(fù)抽吸3次混勻,防止血清調(diào)集孔底,致使非特異性吸附。u  洗刷  洗刷不*  

Elisa試劑盒加酶反應(yīng) 漏加 滴加后,仔細(xì)檢查各孔  效果區(qū)分  
1、有些標(biāo)本顯色不深,區(qū)分陽性艱難??赡苁窍此⒉怀浞?;加樣過量;溫育時刻過長溫度過高;按說明書從頭操作。
2、包括陽性對照在內(nèi),各孔均無顯色;  
3、包括陰性對照孔在內(nèi),各孔顯色廣泛偏深;
4、陽性對照不顯色,而其它樣本顯色正常;
5、每次灌水洗刷,應(yīng)中止30秒鐘;

6、選用吸水紙作為襯墊,每次洗刷后扣干孔內(nèi)水分;
如無改善, 可與生產(chǎn)廠家聯(lián)絡(luò);也可能是漏加樣本或酶液;溫育時刻過短溫度過低;試劑保存不當(dāng)活性下降;按說明書從頭操作。如無改善,可與生產(chǎn)廠家聯(lián)絡(luò);陽性對照漏加、錯加或失效。從頭操作。如無改善,可與廠家聯(lián)絡(luò),索要對照品;從頭操作。運(yùn)用酶標(biāo)儀,測定光吸收度,按P/N值規(guī)范區(qū)分。
ELISA試劑盒保存保存不規(guī)范一定要在2-8℃存放。不得過高,也不得凍存(凍存后,酶液將失效)。對照品 對照品為凍干品按對照管標(biāo)明,參與相應(yīng)體積的去離子水或蒸餾水復(fù)溶,充分溶解混勻??砂凑f明書運(yùn)用。

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