ELISA試劑盒技能可用于測(cè)定抗原,也可用于測(cè)定抗體。ELISA辦法中有三個(gè)必要的試劑:
(1)我們的ELISA試劑盒固相的抗原或抗體,即"免疫吸附劑"(immunosorbent);
(2)我們的ELISA試劑盒酶符號(hào)的抗原或抗體,稱(chēng)為"物"(conjugate);
(3)我們的ELISA試劑盒酶反響的底物。
通??蓪LISA試劑盒分為以下幾種類(lèi)型,試驗(yàn)君首先需要依據(jù)自個(gè)的待檢物來(lái)斷定試劑盒類(lèi)型。
1)雙抗體夾心法:針對(duì)抗原分子上兩個(gè)不一樣抗原決定簇的單克隆抗體別離作為固相捕獲抗體和酶標(biāo)檢查抗體。ELISA試劑盒適用于測(cè)定二價(jià)或二價(jià)以上的大分子抗原如血漿中的細(xì)胞因子,不適用于測(cè)定半抗原及小分子單價(jià)抗原。同理,也有雙抗原夾心法測(cè)抗體。
2)ELISA試劑盒直接法:將抗原直接固定在固相載體上,參加酶符號(hào)的一抗,即可測(cè)定抗原總量。此法操作手續(xù)簡(jiǎn)略,因無(wú)須使用二抗可防止交互反響。
3)間接法:間接法是檢查抗體常用的辦法,其原理為使用酶符號(hào)的抗抗體(抗人免疫球蛋白抗體)來(lái)檢查與固相抗原的待檢抗體。
4)ELISA試劑盒競(jìng)爭(zhēng)法:小分子抗原或半抗原因缺少可作夾心法的兩個(gè)以上的位點(diǎn),因而不能用雙抗體夾心法進(jìn)行測(cè)定,可以選用競(jìng)爭(zhēng)法形式。當(dāng)抗原材猜中的攪擾物質(zhì)不易除掉,或不易得到滿(mǎn)足的純化抗原時(shí),可用此法檢測(cè)特異性抗體。
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