嚴(yán)格按照規(guī)定的時(shí)間和溫度進(jìn)行溫育以保證準(zhǔn)確結(jié)果。所有試劑都必須在使用前達(dá)到室溫20-25℃。使用后立即冷藏保存試劑。
消除板底殘留的液體和手指印，否則影響OD值，洗板不正確可以導(dǎo)致不準(zhǔn)確的結(jié)果。在加入底物前確保盡量吸干孔內(nèi)液體。溫育過程中不要讓微孔干燥掉，避免試劑和標(biāo)本的交叉污染以免造成錯(cuò)誤結(jié)果。
任何反應(yīng)試劑不能接觸漂白溶劑或漂白溶劑所散發(fā)的強(qiáng)烈氣體。任何漂白成分都會(huì)破壞試劑盒中反應(yīng)試劑的生物活性。如果可能傳播疾病，所有的樣品都應(yīng)管理好，按照規(guī)定的程序處理樣品和檢測裝置。
動(dòng)物elisa試劑盒在保存時(shí)也要注意。要留意防止呈現(xiàn)嚴(yán)峻溶血。血紅蛋白中含有血紅素基團(tuán)，其有相似過氧化物的活性，因而，在以HRP為符號酶的ELISA試劑盒測定中，如血清標(biāo)本中血紅蛋白濃度較高，則其就很簡單在溫育進(jìn)程中吸附于固相，然后與后邊參加的HRP底物反響顯色。
血清標(biāo)本如是以無菌操作分離，則能夠在2～8℃下保存一周，ELISA試劑盒如為有菌操作，則主張冰凍保存。樣本的長期保存，應(yīng)在-70℃以下。標(biāo)本在保存中如呈現(xiàn)細(xì)菌污染所造成的的混濁或絮狀物時(shí)，應(yīng)離心沉積后取上清檢測。
樣本的收集及血清分離中要留意盡量防止細(xì)菌污染，一則細(xì)菌的成長，其所排泄的一些酶或許會(huì)對抗原抗體等蛋白發(fā)生分化作用;二則一些細(xì)菌的內(nèi)源性酶如大腸桿菌的β-半乳糖苷酶自身會(huì)對用相應(yīng)酶作符號的測定辦法發(fā)生非特異性攪擾。
冰凍保存的血清標(biāo)本須留意防止因停電等形成的重復(fù)凍融。上海猴ELISA試劑盒標(biāo)本的重復(fù)凍融所發(fā)生的機(jī)械剪切力將對標(biāo)本中的蛋白等分子發(fā)生損壞作用，然后引起假陰性成果。此外，凍融標(biāo)本的混勻亦應(yīng)留意，不要進(jìn)行劇烈振動(dòng)，重復(fù)倒置混勻即可。
