自從Engvall和Perlman(1971)報道建立ELISA(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)，酶聯(lián)免疫試劑盒)(Enzyme-Linked ImmunosorbentAssays， ELISA(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)，酶聯(lián)免疫試劑盒))以來，由于ELISA(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)，
酶聯(lián)免疫試劑盒具有快速、敏感、簡便、易于標(biāo)準(zhǔn)化等優(yōu)點(diǎn)，使其得到迅速的發(fā)展和廣泛應(yīng)用 。 盡管早期的ELISA(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)，酶聯(lián)免疫試劑盒)由于特異性不夠高而妨礙了其在實(shí)際中應(yīng)用的步伐，但隨著方法的不斷改進(jìn)、材料的不斷更新，尤其是采用基因工程方法制備包被抗原，采用針對某一抗原表位的單克隆抗體進(jìn)行阻斷ELISA(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)，酶聯(lián)免疫試劑盒)試驗(yàn)，都大大提高了ELISA(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)。
酶聯(lián)免疫試劑盒的特異性，加之電腦化程度*的ELISA(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)，酶聯(lián)免疫試劑盒)檢測儀的使用，使ELISA(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)，酶聯(lián)免疫試劑盒)更為簡便實(shí)用和標(biāo)準(zhǔn)化，從而使其成為*泛應(yīng)用的檢測方法之一。
酶聯(lián)免疫試劑盒的基本原理如下：
ELISA(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)，酶聯(lián)免疫試劑盒)方法的基本原理是酶分子與抗體或抗抗體分子共價結(jié)合，此種結(jié)合不會改變抗體的免疫學(xué)特性，也不影響酶的生物學(xué)活性。此種酶標(biāo)記抗體可與吸附在固相載體上的抗原或抗體發(fā)生特異性結(jié)合。
滴加底物溶液后，底物可在酶作用下使其所含的供氫體由無色的還原型變成有色的氧化型，出現(xiàn)顏色反應(yīng)。因此，可通過底物的顏色反應(yīng)來判定有無相應(yīng)的免疫反應(yīng)，顏色反應(yīng)的深淺與標(biāo)本中相應(yīng)抗體或抗原的量呈正比。
此種顯色反應(yīng)可通過ELISA(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)，酶聯(lián)免疫試劑盒)檢測儀進(jìn)行定量測定，這樣就將酶化學(xué)反應(yīng)的敏感性和抗原抗體反應(yīng)的特異性結(jié)合起來，使ELISA(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)，酶聯(lián)免疫試劑盒)方法成為一種既特異又敏感的檢測方法。
用于標(biāo)記的酶 用于標(biāo)記抗體或抗抗體的酶須具有下列特性:有高度的活性和敏感性;在室溫下穩(wěn)定;反應(yīng)產(chǎn)物易于顯現(xiàn);能商品化生產(chǎn)。目前應(yīng)用較多的有辣根過氧化物酶(HRP)、堿性磷酸酶、葡萄糖氧化酶等，其中以HRP應(yīng)用*。
