更新時(shí)間:2024-06-14
MOC1細(xì)胞系在使用中,可增加到2ml IMDM和2ml冷凍培養(yǎng)基,以儲(chǔ)存在4個(gè)小瓶中。此外,最好在冷凍細(xì)胞 前計(jì)數(shù)細(xì)胞并記錄在小瓶上。
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基本信息
細(xì)胞名稱 :MOC1細(xì)胞系
T150燒瓶 :07-200-64
T75燒瓶 :10-126-37
冷 凍 劑 :03-374-059
45um過濾器 :09-754-21
惰性譜線 :MOC1,22
侵略性線 :MOC2
IMDM :sh30228.02 Hams
營養(yǎng)混合物F10-F12 :sh30026.01胎牛血清,特征-??寺?/span>
目錄 / 批次號(hào) :sh30071.03 / AWK24001
過濾1L過濾器瓶的過濾器 :09-761-108
科學(xué)試劑目錄編號(hào) 胰島素:I6634-50mg
EMD微孔試劑目錄編號(hào) :表皮生長因子(EGF),重組人:01-107
MOC1細(xì)胞系
解凍細(xì)胞系
1. 在解凍前,將21ml IMDM MOC線培養(yǎng)基加入到T150中(如果想解凍成T75,則將10ml加入到T75 中)2. 將液氮從冷凍瓶中取出,噴上含有70%酒精的小瓶進(jìn)行清洗。
3.將冷凍瓶的下半部分放在37攝氏度的水浴中(不讓蓋子接觸水,以避免污染),直到 有一小塊冰漂浮著。
4.再次用ETOH噴灑冷凍瓶,然后放在引擎蓋上。將1ml培養(yǎng)液移液管加入到1ml細(xì)胞中,并將這 些2ml加入到已經(jīng)含有培養(yǎng)基的T150中(使一個(gè)T150總共有22ml)。
5.在T150燒瓶中取一些培養(yǎng)基,沖洗冷凍瓶,然后平板放置,以確保所有殘留的細(xì)胞都留在冷 凍瓶中。
冷凍細(xì)胞系
1. 從T150中收集細(xì)胞
2. 在15ml錐形管中旋轉(zhuǎn)成顆粒(1000 RPM x5分鐘)
3. 排出上清液
4. 點(diǎn)擊15ml圓錐形管,重懸細(xì)胞
5. 加入1.5ml IMDM MOC系培養(yǎng)基,在培養(yǎng)基中重建細(xì)胞-保持冰上
6. 管入冰時(shí)緩慢加入1.5 ml冷凍介質(zhì)(在IMDM MOC線介質(zhì)中制作冷凍介質(zhì)-20%DMSO。例:20ml庫存-加入16ml IMDM MOC線培養(yǎng) 基和4ml DMSO。注射器過濾器,使用um過濾器
7. 每份1毫升到3個(gè)冷凍瓶
8. 在-80攝氏度內(nèi)儲(chǔ)存不超過2周
9. 在1-2周內(nèi)放入液氮溶液中
注:如果需要,可增加到2ml IMDM和2ml冷凍培養(yǎng)基,以儲(chǔ)存在4個(gè)小瓶中。此外,最好在冷凍細(xì)胞 前計(jì)數(shù)細(xì)胞并記錄在小瓶上。
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