更新時間:2024-06-10
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細(xì)胞培養(yǎng)過程中,從實(shí)驗(yàn)室的設(shè)計(jì)到實(shí)驗(yàn)過程中的操作,都需要嚴(yán)格控制無菌。由于細(xì)胞對于生長的條件比較苛刻,所以無論從實(shí)驗(yàn)室的設(shè)計(jì),還是使用的物品及細(xì)胞培養(yǎng)的操作過程,都要注意保持無菌環(huán)境。
傳代方法:細(xì)胞*匯合時,倒掉舊液,加入消化液(0.25%胰蛋白酶+0.03%EDTA)2ml消化,顯微鏡下觀察細(xì)胞*脫離瓶壁分離成單個細(xì)胞后棄掉胰酶,加培養(yǎng)基混勻分瓶,T25瓶中加培養(yǎng)基至6-8ml,T75瓶加培養(yǎng)基至20ml,37℃,5%CO2孵箱培養(yǎng)。
培養(yǎng)是生物學(xué)和醫(yī)學(xué)研究zui常用的手段之一,可分為原代培養(yǎng)和傳代培養(yǎng)兩種。原代培養(yǎng)是直接從生物體獲取細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)。由于細(xì)胞剛剛從活體組織分離出來,故更接近于生物體內(nèi)的生活狀態(tài)。這一方法可為研究生物體細(xì)胞的生長、代謝、繁殖提供有力的手段,同時也為以后傳代培養(yǎng)創(chuàng)造條件。利用此方法還可直接服務(wù)于臨床實(shí)踐。
實(shí)驗(yàn)器皿:
→ 玻璃瓶及相應(yīng)的膠塞或膠木螺旋蓋
→ 用培養(yǎng)瓶、蓋玻片
→ 移液管、吸管、燒杯、離心管和培養(yǎng)皿
→ 塑料培養(yǎng)皿(35mm)、塑料培養(yǎng)板(6、24、96孔)
注意 : 培養(yǎng)用的蓋玻片必須不含鉛、不發(fā)霉,可用0.2N鹽酸浸泡10分鐘,小鼠腦微血管內(nèi)皮細(xì)胞 Bend3細(xì)胞用蒸餾水洗2次,每次10分鐘,然后移入丙酮或乙醇浸泡10分鐘,再用雙蒸水洗2次,每次10分鐘,烘干待消毒。凡組織學(xué)用過的舊蓋玻片一般不用,從培養(yǎng)箱內(nèi)取出細(xì)胞時要旋緊瓶蓋,用酒精棉球擦拭顯微鏡的臺面,再在鏡下觀察細(xì)胞。
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服務(wù)流程:
預(yù)約登記→
辦理相關(guān)手續(xù)→
復(fù)蘇細(xì)胞→
細(xì)胞質(zhì)量檢查→
發(fā)送細(xì)胞(或自己來取細(xì)胞)→
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